BLOODNALIZATE
Kit bioquímico.
Determinación del hierro por colorimetría directa
¿En qué consiste?
El hierro sérico se libera de la unión con su proteína transportadora específica, la transferrina, en acetato pH 4,5 y en presencia de un reductor, el ácido ascórbico. Posteriormente reacciona con el reactivo de color, piridil bisfenil triazina sulfonato (ferrozina) dando un complejo color magenta, que se mide a 560 nm.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
1. Partimos de una muestra de suero o plasma.
( sangre centrifugada).
REACTIVOS:
-Reactivo A: Solución de ácido cítrico 150 mM.,Ph -4,5 ,conteniendo guanidina .
-Reactivo B: Solución estabilizada de ferrozina.
-Reactivo C: Solución ácido abscórbico.
-Reactivo Standard: Solución de iones Fe (III) equivalente a 100ul/dl.
2. Preparamos 3 tubos, el BLANCO, el STANDARD y la MUESTRA.
- En el blanco ponemos 500 ul de agua destilada y 2ml de reactivo C
- En el standard ponemos 500 ul de reactivo standard y 2 ml de reactivo C.
- En la muestra ponemos 500 ul de suero o plasma y 2ml de reactivo C
3. Ponemos en el espectrofotometro las 3 muestras en cubetas a 560 nm.
